Y迷宮實驗材料 大鼠 小鼠
儀器、耗材 Y-迷宮由三等分輻射式迷路箱 控制儀
一、Y迷宮實驗方法
1. 篩(預)選
(1)將大鼠放入Y-迷宮箱中適應3~5 min后,給予適當電刺激至其對3臂均探索進入為止。選擇活躍,對電刺激反應較敏感,逃避反應迅速者供測試用。淘汰反應過于遲鈍或特別敏感的大鼠。
(2)預選出達到電刺激次數≤3次時連續2次正確反應的動物,即對電刺激反應較敏感的大鼠供實驗用。
(3)在上述初步篩選的基礎上,通過正式迷宮訓練,淘汰達不到學會標準(學不會)的大鼠。
2. 正誤判定的標準
大鼠受電刺激后從起步區直接逃到安全區或通電后10s內一次性跑向安全區為“正確反應”,若逃到無燈光的另一臂,則記為錯誤反應。
3. 達標(學會)標準
(1)連續10次中有9次或以上正確反應(正確反應率≥90%)定為學會標準。
(2)每個實驗日進行20次訓練測試,錯誤反應次數(errors number EN)≤2次。全天總反應時間(total reaction time TRT)≤120s作為判定大鼠學會的標準。因為EN反映大鼠反應的正確程度,TRT反映大鼠反應時間的長短,可綜合評價大鼠的學習記憶能力,因而此標準更為合理。
以上為每只大鼠達標(學會)標準,全組大鼠達標(學會)標準為全組正確率(學會動物數/該組動物總數×)達85% 以上。
4. 學習測試
實驗時先將大鼠放入迷宮中適應3~5 min,然后再開始正式實驗。
(1)隨機休息法:安全區以無規則次序變換,以訓練大鼠辨別燈光刺激及安較好的的能力,大鼠受電刺激后逃到安全區后,燈光繼續作用10~15s,熄燈后結束一次測試,大鼠所在支臂就作為下一次測試的起點,兩次測試時間間隔為30s或休息1 min 后再予以第2次測試,依次重復,測試至達連續9/10標準。
(2)隨機不休息法:安全區以無規則的次序變換開始時,對大白鼠所在支臂與另一支臂通電,動物在電刺激下逃竄至燈光區后再保持l0s或30s為一次測試。然后動物所在支臂為下次測試的起始位置進行下一次測試。
(3)順序法:三臂末端按Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅰ臂輪流作為起步區或安全區。
以上方法還可以分為兩類:①每天固定訓練次數,一般是20次,連續訓練3~4 d。大鼠一般都能達到學會標準。②不固定訓練次數,采用分段連續訓練法,即每訓練10次,休息1 min,連續訓練直到學會為止,訓練在1 d內完成。
5. 記憶保持(再現)測試
學習測試24 h、48 h、1周、30 d后,再以同樣方法測試至9/10標準,正確反應次數定為A,以A/10表示記憶的保持能力,此值越高說明記憶力越好。
二、觀察指標
1. 達標所需的訓練次數(電刺激次數、反應次數、測試次數):用動物學習達到學會標準前所需的測試數,表示其空間分辯反應的學習記憶成績。
2. 達標所需的天(日)數:記錄每只大鼠達到學會標準所用的日數。
3. 錯誤反應次數(errors number EN ):一個實驗日完成所有反應中錯誤反應的次數。
4. 全天總反應時間(total reaction time TRT):動物的反應時(潛伏期)指從信號燈亮開始至大鼠第1次逃至燈亮區為止所耗的時間,全天總反應時是一個實驗日(全天)完成所有反應(包括正確反應和錯誤反應)所需時間。
5. 主動回避率:大鼠在燈亮后但未通電的5s內完成逃避反應的次數占總反應次數的百分率。安全區燈亮,電刺激尚未開始時,大鼠即逃往安全區表明大鼠已經形成了明暗辨別條件反射(主動回避反應)。
6. 正確反應率(行為正確率):正確反應數占總測試數的百分比。
7. 全組正確率:學會動物數占該組動物總數的百分比。
8. 3d學會率:訓練第3d達學會標準的動物數占該組動物總數的百分比。動物數占該組動物總數的百分比。