骨缺損模型
目前常用于制作骨缺損模型的動物有小鼠,大鼠,兔,犬,豬,羊等。
骨缺損動物模型理論上是選擇越大型的動物越好,比如犬,豬,羊等。
一則越大型的動物骨折愈合機制與人類越相似;再則越大型的動物制作過程中越易于操作。大型動物也有實驗成本過高,樣本數量難以保證的現實缺點。
小鼠模型價格低廉,來源廣泛,小鼠自身具有較強的抗感染及耐受手術的能力,且圍手術期易于管理,因此小鼠模型具有一定優勢。
一般小鼠選擇2到3個月的小鼠作為模型,雌兔選擇6到10個月的兔作為模型。
骨缺損模型骨缺損部位選擇
骨缺損的部位可以劃分為負重部位骨缺損與不負重部位骨缺損兩類。
機械性骨損傷
機械性骨缺損可用于模擬創傷或手術導致部分骨受損或缺失的情況。
依據骨缺損的部位,機械性骨缺損主要有4種類型:顱骨缺損、長骨節段性缺損、部分皮質缺損和松質骨缺損模型。
1. 顱骨缺損模型
顱骨是研究原位骨愈合常用的手術部位之一,動物選小型嚙齒類動物,如小鼠、大鼠。
造模舉例:
通常選取成年雄性大鼠,鹽suan氯an酮(40mg/kg)與鹽酸甲苯噻嗪(8mg/kg)聯合麻醉,也有采用10%水he氯醛(4ml/kg)腹腔注射麻醉。大鼠頭顱備皮、消毒鋪巾后,從鼻骨開始,沿顱骨矢狀線取縱行手術切口,長約1.5~3cm,逐層分離軟組織,充分顯露矢狀縫、雙側頂骨及部分額骨和枕骨。
根據圓形缺損直徑大小的不同,在不同部位進行鉆孔建模,直徑≤6mm一般在雙側頂骨處鉆孔;直徑>6mm一般以矢狀縫為中心進行鉆孔。鉆孔前需將骨膜充分剝離,將不同直徑的空心鉆頭連接電鉆后,低速(≤1500rpm)鉆取,鉆取過程中助手用生理鹽水滴注(1滴/2s)降溫。鉆取時動作需輕柔(單純憑借電鉆的自然重力,盡量不附加外力),避免將骨組織全鉆穿,接近鉆穿時用剝離器沿著圓形缺損周邊進行鈍性分離,從而避免硬腦膜及其下方的血管、腦組織的損傷。生理鹽水沖洗術野,探查無活動性出血后,用0號線逐層關閉皮下組織、皮膚切口。術后大鼠側臥于30℃恒溫臺進行麻醉復蘇,全清醒后送回飼養籠繼續喂養,于術后8~12h,20~24h,32~36h分別予以丁丙nuo啡(0.05mg/kg)腹腔注射鎮痛。
大鼠的種系一般選擇SpragueDawley(SD)大鼠和Wistar大鼠,這兩個品種的大鼠生長較快、繁殖能力強,容易飼養,對傳染病的抵抗力較強。
通常采用成年的雄性大鼠進行動物實驗,SD大鼠一般>12周(體重300~350g)。
大鼠顱骨中常用的臨界骨缺損直徑為5~8mm。一般認為,這種5mm骨缺損的優點是每只動物能誘發兩個缺陷,避免跨越矢狀縫。
顱骨缺損模型在研究中應用廣泛,是可用組織學和放射學分析的標準化骨缺損,可用于評估骨組織工程生物材料之間的差異,缺點是無法評估生物材料在生理力學載荷下的性能。