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番紅-固綠染色實驗
更新時間:2024-09-12
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廠商性質(zhì):其他
番紅-固綠染色實驗(軟骨)在涉及關(guān)節(jié)軟骨及軟骨下骨的形態(tài)學(xué)研究中,常需要聯(lián)合使用多種染料以顯示其組織學(xué)結(jié)構(gòu)。其中,起源于上世紀(jì)60年代的番紅O-固綠染色因可以直觀反映關(guān)節(jié)軟骨、軟骨下骨和骨組織的結(jié)構(gòu)而備受青睞。
軟骨組織由軟骨細(xì)胞和軟骨基質(zhì)組成,軟骨組織及其周圍的軟骨膜構(gòu)成軟骨。軟骨根據(jù)基質(zhì)內(nèi)所含纖維素成分不同分為透明軟骨、彈性軟骨、纖維軟骨。軟骨染色方法有很多種,例如甲苯胺藍(lán)法、阿利新藍(lán)法、番紅O法等。番紅O-固綠軟骨染色法的染色原理在于嗜堿性的軟骨與堿性染料番紅O結(jié)合呈現(xiàn)紅色,嗜酸性的骨和酸性染料固綠結(jié)合而呈綠色或藍(lán)色,與呈現(xiàn)紅色的軟骨對比鮮明,從而將軟骨組織與骨組織區(qū)分開。通過圖像分析軟件可對番紅O染色的軟骨基質(zhì)進(jìn)行定量分析。
番紅-固綠染色實驗步驟:
(1)骨組織固定、脫鈣,制成石蠟切片;
(2)切片常規(guī)脫蠟至水;
(3)入新鮮配制的Weigert染液染色;
(4)流水沖洗;
(5)酸性乙醇分化液分化;
(6)蒸餾水洗;
(7)在固綠染色液內(nèi)浸染;
(8)蒸餾水洗;
(9)入番紅O染液內(nèi)浸染;
(10)蒸餾水洗;
(11)用乙酸溶液洗滌切片,以便去除殘留的固綠,再用蒸餾水洗;
(12)分別用95%乙醇,無水乙醇脫水;
(13)二甲苯透明,中性樹脂封固;
(14)鏡檢。
染色結(jié)果:軟骨基質(zhì)深紅色,軟骨細(xì)胞核藍(lán)色,細(xì)胞漿、肌肉、膠原纖維及骨組織呈灰綠色。