肢體缺血動物模型構建是實驗平臺組成之一,該實驗由從事動物實驗專業,經驗豐富的人員進行操作。
肢體缺血動物模型構建本公司實驗過程所用試劑,全部為進口試劑,已實驗的準備性。
肢體缺血動物模型是進行缺血損傷機制、血管新生等研究的基礎,成功制作一種效果確切、重復性強的肢體缺血模型是保證實驗研究能夠順利進行的關鍵。當前缺血性疾病患者日漸增多,以糖尿病肢體動脈閉塞癥(DAO)、閉塞性動脈硬化癥(ASO)和血栓閉塞性脈管炎(TAO)為主的下肢缺血性疾病發病率逐年增加。國外資料顯示,70歲以上老年人群中僅動脈硬化閉塞癥患病率即可達15%~20%。而患病人群范圍可覆蓋至青壯年,其高發生率和廣泛累及率已嚴重危害著人們的身心健康和生存質量,亟待探索其發生機制、預防措施及治療方法。建立缺血動物模型是開展缺血性疾病研究的一種有效途徑。通過對動物模型的在體研究,有助于闡明缺血性疾病的病變機制、發展過程,篩選出有特異性治療作用的藥物及方法。近年來,通過建立動物后肢缺血模型進行血管新生、基因療法和干細胞移植等研究已成為現代生物醫學領域中的研究熱點。綜合國內外研究資料可見,肢體缺血模型適用于急性缺血、慢性持續性缺血、肢體缺血再灌注以及缺血預處理等幾方面的研究。因此,如何根據實驗目的正確選擇肢體缺血模型的制作方法,以及如何對該模型的缺血效果進行評價,從而制作出效果確實可靠、穩定性良好的肢體缺血模型顯得尤為重要。有學者根據缺血效果將缺血動物模型總結為暫時缺血和永遠缺血兩大類,本研究現對這兩類肢體缺血模型的建立、應用和評價作一總結,以期為該模型的相關研究應用提供參考。
模型制作
暫時缺血模型
暫時缺血模型包括肢體缺血再灌注損傷模型以及缺血預處理模型,適用于肢體缺血再灌注損傷的防治、肢體遠距缺血預處理和肢體遠距缺血后適應的研究。暫時缺血模型制作方法分為肢體環扎法和暫時阻斷動脈法兩種。肢體環扎法是外用繃帶、止血帶或橡皮筋等物質環扎于動物單側或雙側肢體根部,一段時間后放開,以此達到暫時缺血的目的。環扎時間視研究目的而異,缺血再灌注損傷一般為4 h左右,而肢體缺血后適應或肢體遠距預處理多為5 min,并反復多次進行。肢體環扎法具有無創性,對實驗動物的損傷較小。暫時阻斷動脈法通過手術分離實驗動物某側局部供血動脈,用血管夾暫時夾閉血流,3h(及以上)后撤夾恢復血流灌注,其效果比肢體環扎法可靠,但對實驗動物的損傷較大。Messina 等將兩種方法相結合使用,以加強肢體的急性缺血程度,其效果較單純環扎或單純夾閉血管要好。大體上看,暫時缺血模型的建立方法簡便、易行,效果能夠令人滿意,基本上可以符合實驗要求。