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脾單核細胞分離實驗

脾單核細胞分離實驗

簡要描述:
脾單核細胞分離實驗是伊萊博生物細胞平臺的基礎服務項目之一,由專業的實驗技術人員操作完成。

更新時間:2023-10-30

訪問量:982

廠商性質:其他

脾單核細胞分離實驗操作方法:

采用頸椎脫臼法處死小鼠,于75%的酒精中浸泡10-15min;
在無菌超凈臺內分離脾臟,放入PBS溶液(按照1:50的比例加入雙抗)中清洗2遍;
將清洗后的脾臟組織轉移至離心管中,加入適量的RMPI-1640培養基,用剪刀將其剪碎成糜狀;
將剪碎后的組織經200目的濾網過濾,得到脾細胞懸液;
另取一個離心管,先加入與細胞懸液等量體積的淋巴細胞分離液,之后將細胞懸液輕輕加到離心管的淋巴細胞分離液上層(注意45度傾斜沿管壁滴加,一定要緩慢否則懸液沉下去導致分層界面不明顯);
3000rpm離心10min,離心完畢后吸取中間白膜層即為脾單個核細胞;
3000rpm離心10min,加入RMPI-1640培養基進行洗滌一次;
用紅細胞裂解液去除紅細胞;3000rpm離心10min,再次用RMPI-1640培養基進行洗滌一次;
洗滌結束后,所得細胞沉淀用RMPI-1640培養基重懸后進行細胞計數。

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