實驗操作流程:
1.轉染試劑的準備
a.將400u去核酸酶水加入管中,震蕩10秒鐘,溶解脂狀物。
b.震蕩后將試劑放在- 20攝氏度保存,使用前還需需蕩。
2。選擇合適的混合比例(1: 1-1: 2脂質體[1體積: DNA質量來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養基。加入合適質量的MyoD或者EGFP的ONA,電蕩后在加入合適體積的轉染試劑,再次震蕩。
3、將混合液在室溫放置10-15分鐘。
4、吸去培養板中的培養基,用PBS或者無血清培養基清洗一次。
5、加入混合液,將細胞放回培養箱中培養-個小時。
6.到時后,根據細胞種類決定是否移除混合液,之后加入*培養基繼續培養24-48小時。
轉染 ,是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因導入細胞的范例;化學介導方法很多,如經典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染方法、和多種陽離子物質介導的技術;生物介導方法,有較為原始的原生質體轉染,和現在比較多見的各種病毒介導的轉染技術。
伊萊博生物擁有豐富的研究經驗,具備完善的系統化管理能力和科研服務體系。目前已自建細胞、分子、病理等實驗平臺近1000平方米,擁有的儀器設備、細胞庫、樣本保存庫等。動物實驗中心近1800平方米,可滿足同時飼養清潔級和SPF級動物。核心實驗技術團隊主要來自中國科學院大學、復旦大學、上海交通大學等重點高校及科研機構,能夠為客戶提供研究方案策劃、項目實施及項目深度分析等方面的技術支持。公司目前參與研究項目已經涵蓋心腦血管、腫瘤、內分泌、生殖、免疫、神經等諸多領域。